Sodobni problemi znanosti in izobraževanja. Napredek v sodobnem naravoslovju Proizvodnja AFC v ejakulatu s spranimi semenčicami

Posebne lastnosti molekule kisika in produktov njegove transformacije

Ciljna proizvodnja ROS v živih celicah

Ciljna proizvodnja ROS v živih celicah

Vsi organizmi so opremljeni z različnimi mehanizmi za ciljno generiranje ROS. Že dolgo je znano, da encim NADPH oksidaza aktivno proizvaja "strupeni" superoksid, ki ustvarja celotno paleto ROS. Toda do nedavnega je veljalo za specifično lastnost fagocitnih celic imunskega sistema, kar je pojasnilo potrebo po proizvodnji ROS kot kritične okoliščine zaščite pred patogenimi mikroorganizmi in virusi. Zdaj je postalo jasno, da je ta encim vseprisoten. Ta in podobni encimi se nahajajo v celicah vseh treh plasti aorte, v fibroblastih, sinocitih, hondrocitih, rastlinskih celicah, kvasovkah, ledvičnih celicah, nevronih in astrocitih možganske skorje O 2 - á proizvajajo druge vseprisotne encime: NO sintazo , citokrom P-450, gama-glutamil transpeptidaza in seznam se še povečuje. Pred kratkim so odkrili, da so vsa protitelesa sposobna proizvajati H 2 O 2, tj. so tudi generatorji ROS. Po nekaterih ocenah se tudi v mirovanju 10-15% vsega kisika, ki ga porabijo živali, reducira na en elektron, v stresnih razmerah, ko se aktivnost encimov, ki ustvarjajo superoksid, močno poveča, se intenzivnost redukcije kisika poveča še za 20 %. Tako mora imeti ROS zelo pomembno vlogo v normalni fiziologiji.

Androloški laboratorij

Spermogram po WHO 2010 1607 str.

Antispermalna protitelesa na spermi (Mar test indirektni Ig G) 1928 str.

Antispermalna protitelesa na spermi (Mar test indirektni Ig A) 1928 str.

Antispermalna protitelesa na spermi (Mar test direktni Ig G) 1499 rubljev

Antispermalna protitelesa na spermi (Mar test direktni Ig A) 1499 rubljev

Postkoitalni test (test in vivo) 2142 str.

Kurzrock Millerjev test 2142 str.

Klinični androloški laboratorij izvaja posebne preiskave za moške

Vsi fantje pred odhodom v vojsko opravijo zdravniški pregled v šoli. To pomaga prepoznati različne motnje, vključno s tistimi, ki so povezane z reproduktivno zdravje. Redko se zgodi, da se mladenič naknadno na lastno pobudo posvetuje z zdravnikom zaradi preventive. V bistvu pridejo na pregled, ko že obstajajo pritožbe, bodisi na pobudo partnerja bodisi v zakonski zvezi, ko več let ne morejo spočeti otroka.

V vseh teh primerih, tako za preprečevanje kot ob različnih težavah, je naša naloga objektivno oceniti situacijo, pravilno izbrati seznam potrebnih testov, opraviti raziskavo in poslati rezultate e-pošta bolnik. V prihodnosti, če je potrebno, se lahko bolnik pogovori o podatkih teh testov z urologom-andrologom ali ginekologom-reproduktologom, ki delajo v naši kliniki.

Glavno področje dela kliničnega androloškega laboratorija je moška neplodnost in kombinirane oblike moške in ženske neplodnosti ter infekcijski in vnetni procesi. genitourinarni sistem moški.

Zaposleni v laboratoriju - zdravniki, medicinski tehnologi, laboranti - sodelujejo že 6 let in so vodilni specialisti spermatologije pri nas. Mnogi imajo izkušnje z delom v Znanstveno središče porodništva in ginekologije poimenovana po. V.I. Kulakov, Urološka klinika poimenovana po. R.M.Fronshtein s Prve moskovske državne medicinske univerze poimenovana po. NJIH. Sechenov, androloška klinika Ruska univerza prijateljstvo narodov. Laboratorijske raziskave, ki jih izvajajo naši zaposleni, so osnova mnogih znanstvena dela o andrologiji, disertacije in publikacije, vklj. v vodilnih revijah v angleškem jeziku.

Usposobljenost, potrebna oprema in dolgoletne izkušnje nam omogočajo izvajanje različnih semenčičev na strokovni ravni.

Analize se izvajajo natančno v skladu z vsemi zahtevami WHO 2010.

Najnaprednejše so uvedli v klinično prakso sodobne metode ocena delovanja semenčic: oksidativni stres, akrosomska reakcija, fragmentacija DNA, motnje pakiranja kromatina itd.

Vse analize se izvajajo kar tukaj v laboratoriju, ne vozijo se nikamor, takoj ko je material utekočinjen.

Obstajajo odlični pogoji za darovanje sperme: ločena zvočno izolirana soba z WC-jem in umivalnikom, velik TV. Soba za darovanje sperme se nahaja neposredno ob laboratoriju.

Pregled ejakulata (sperme) - osnovne zahteve

Študija semenčic - koncentracija, gibljivost in morfologija semenčic, vsebnost levkocitov, antispermalnih protiteles, poškodbe DNK in številni drugi funkcionalni kazalniki - je glavna metoda za ocenjevanje moške plodnosti.

Kljub izvedbi računalniška tehnologija, je testiranje semena, ki ga opravi izkušen laboratorijski tehnik, še vedno najbolj natančna, zanesljiva in ponovljiva diagnostična metoda.

Preglede semenčic je treba izvajati v specializiranih laboratorijih in ne v splošnih laboratorijih (zlasti ne v mrežnih laboratorijih), saj je opis večine parametrov spermograma - gibljivost, morfologija, MAP test itd. - subjektiven in kritično odvisen od izkušenj in kvalifikacij. laboratorijski zdravnik V idealnem primeru bi morala dinamično analizo sperme opraviti en specialist, saj lahko tudi pri strogem notranjem nadzoru kakovosti v laboratoriju pride do odstopanj v rezultatih, ko analizo izvajajo različni zdravniki.

Sperma je zapleten material. Povečana viskoznost, pomanjkljiva dobava, prisotnost levkocitov, nezrelih semenčic, bakterij, različne kategorije mobilnost lahko pravilno določi le zdravnik z bogatimi izkušnjami. Za v zadnjem času Standardi WHO za testiranje sperme so se večkrat spremenili, različni laboratoriji pa imajo različne referenčne vrednosti. Upoštevati je treba tudi sezonska nihanja parametrov spermograma, bolnikovo stanje pri v tem trenutku, njegove psihološke značilnosti.

Spermo za analizo je treba darovati po spolni abstinenci od 2 do 7 dni, po možnosti bližje običajnemu ritmu spolne aktivnosti. Izogibajte se alkoholu, ne zbolite, ne jemljite pare, ne vzemite vroče kopeli, bodite zdravi.

Če parametri spermograma med začetnim pregledom odstopajo od normalnih vrednosti, je treba analizo ponoviti po 2-6 tednih za potrditev diagnoze. Ker spermatogeneza - proces nastajanja zrele spermatogeneze - traja skoraj 3 mesece, lahko vsak negativen vpliv(vročina, stres, zastrupitev itd.) lahko v tem času vplivajo na kakovost sperme.

Treba je razumeti, da tudi z velikim številom semenčic in dobro mobilnostjo morda ne bodo izpolnili svoje glavne funkcije - oploditve jajčeca, ker pride do "razpada" na drugi ravni. Po zadnjih podatkih je do 30% primerov moške neplodnosti se pojavi z "normozoospermijo" - formalno normalnim spermogramom. Vzpostavitev moškega dejavnika neplodnosti v tem primeru zahteva uporabo posebnih funkcionalnih testov.

Osnovni testi za postavitev diagnoze »plodna« ali »neplodna« (lahko imajo otroke ali ne) so trenutno:

Spermogram - določanje volumna, viskoznosti, pH sperme, koncentracije, gibljivosti in morfologije semenčic, njihove aglutinacije, števila levkocitov in številnih drugih parametrov.

MAR test je test prisotnosti antispermalnih protiteles (ASAT), ki povzročajo imunsko neplodnost. Obstajajo ACAT razreda IgG in razreda IgA, ki imata svoje značilnosti.

Reaktivne kisikove spojine (ROS ali ROS) v nativnem ejakulatu (spermi) in sprani spermi. Povečanje proizvodnje aktivne oblike kisik v nativnem ejakulatu je občutljiv marker infekcijsko-vnetnega procesa (občutljivejši kot število levkocitov). Proizvodnja ROS s sprano spermo je znak oksidativnega stresa v zarodnih celicah, pri katerem so prizadeti celo kromosomi. Oksidativni stres semenčic je vzrok ne le za moško neplodnost, ampak tudi za spontani splav in prirojene nepravilnosti pri otrocih.

Te tri analize bodo pomagale postaviti pravilno diagnozo, začrtati nadaljnje načine zdravljenja ali ugotoviti potrebo po dodatnih raziskavah v primeru odkritih motenj.

Treba je opozoriti, da mladi moški vsak dan pridejo na spermogram in niti ne sumijo na prisotnost gnojnega procesa, ko je veliko število levkociti. To lahko povzroči nadaljnjo blokado semenovoda in posledično semenčice ne pridejo ven ali, še huje, pride do motenj v procesu njihovega nastajanja. Zato sta diagnostika moške plodnosti in infekcijski proces v našem laboratoriju neločljiva. Le v obarvanih brisih je mogoče videti in razlikovati levkocite in nezrele celice spermatogeneze na različnih stopnjah razvoja. In če se odkrije gnojni proces, je mogoče spermo takoj pregledati za spolno prenosljive okužbe in opraviti bakterijsko kulturo za aerobe in anaerobe. Prav tako morate razumeti, da je vnetje lahko zaznano v semenu, vendar bo izloček prostate normalen, in obratno, lahko pride do vnetja v izločku prostate, vendar bo sperma normalna. Spolno prenosljive okužbe se pregledajo iz strgana iz sečnice, za to pacient ne sme urinirati več kot tri ure. Moški vseh starosti prihajajo k nam na preiskave za ustrezno diagnozo prostatitisa.

Glede na način življenja sodobnega mladeniča - zgodnje spolno življenje, veliko število spolnih partnerjev, seks brez mehke kontracepcije, sedeč način življenja, stres - priporočamo preventivni pregled ne le za okužbe, ampak tudi spermogram za spremljanje poroda. zdravega potomstva.

Semenska tekočina moških, bolj znana kot sperma, se v medicini imenuje ejakulat. To je naravna tekočina, ki jo izločajo testisi in ima značilno sluzasto strukturo, viskozno in neprozorno.

Do izločanja ejakulata pride zaradi spolnega vzburjenja med spolnim odnosom ali masturbacijo. Ejakulat ima specifičen vonj, podoben aromi kostanja, in je svetle, skoraj bele barve.

Okus tekočine je odvisen od hrane, ki jo človek uživa, in njegovega splošnega zdravja. Pri zdravih samcih ima rahlo slan okus z grenkim odtenkom. Kot vsaka tekočina človeško telo, lahko ejakulat pregledamo v laboratoriju, da ocenimo bolnikovo zdravstveno stanje.

Analiza ejakulata se izvaja na dva načina: bakteriološka kultura in spermogram.

Glavne značilnosti sperme

Med spolnim odnosom ali masturbacijo se sprosti majhna količina semenske tekočine, katere prostornina je odvisna od več dejavnikov. Po medicinskih standardih mora biti od dva do deset mililitrov.

Pri odraslih moških pa je lahko količina sperme manjša, njena prostornina se zmanjša z vsakim spolnim odnosom, po kratkih časovnih intervalih. Zato se zdravniki pogosto osredotočajo na normalne meje dveh do petih mililitrov.

Zelo pogosto predstavniki močnejšega spola jemljejo zmanjšanje količine izločene sperme kot zaskrbljujoč znak, ki kaže na poslabšanje moške moči in zdravja. Moški v mladosti verjamejo, da več kot se sperma sprosti med ejakulacijo, večji učinek ima na njihovega spolnega partnerja.

Pravzaprav sta količina sproščenega ejakulata in njegova kakovost dve popolnoma različni stvari. Velika količina sperme ni vedno pokazatelj visoke plodnosti. Toda glavna stvar v ejakulatu je število zdravih in aktivnih semenčic, ki lahko dosežejo jajčece in ga oplodijo.

Ta sposobnost oploditve semenčic se izračuna v laboratorijskih pogojih. Po raziskavah naj bi 1 mililiter sperme vseboval od 20 do 25 milijonov zdravih semenčic.

Sam ejakulat je sestavljen iz semenske plazme in oblikovanih elementov. Slednji ne vključujejo samo spermijev, ampak tudi gonocite. Semenska plazma je osnova sperme, odgovorna za njeno pravilno zgradbo. Izstopa, če vsi notranji moški organi delujejo pravilno in usklajeno. Kako zdrava je semenska tekočina, je mogoče oceniti le z laboratorijskimi preiskavami.

Semekultura in spermogram so bolnikom predpisani v naslednjih primerih.

1. Neplodnost. Ta diagnoza se postavi poročenim parom, ki v enem letu aktivne spolne aktivnosti niso mogli sami spočeti otroka.
2. Kot pregled pred postopkom zunajtelesne oploditve.
3. Če sumite na možno izgubo lastnosti sperme zaradi predhodnih bolezni ali poškodb spolnih organov (nalezljive bolezni, hormonsko neravnovesje, varikokela itd.).
4. Kot preventivni pregled na željo bolnika.
5. Študija ejakulata je del obvezne diagnostike, ko zakonski par načrtuje spočetje otroka.

Vendar pa je glavna naloga ta študija- to je definicija razloga, ki moškemu preprečuje, da bi postal oče, to je neplodnost. Študija ejakulata pomaga ugotoviti razloge za zmanjšanje količine izločene tekočine in zmanjšanje števila aktivnih semenčic.

Ti testi bodo ugotovili morebitna vnetja in okužbe, ki so prizadele pacienta, kar bo pomagalo pri začetku zdravljenja ne le neplodnosti, ampak tudi drugih obolenj ter povečalo število aktivnih semenčic.

Semekultura je ena najpogosteje izvajanih diagnostik, predpisanih za preučevanje moškega zdravja. Diagnozo neplodnosti vse pogosteje postavljajo popolnoma zdravi mladi ljudje, ki se ne pritožujejo nad drugimi vidiki svojega zdravja. Kaj vodi do razvoja te bolezni?

Najprej je kriv bolnik. Nezdrav življenjski slog, slabe navade, slaba prehrana - vse to vodi v hormonsko neravnovesje v telesu, kar ima za posledico zmanjšanje števila zdravih semenčic in njihove aktivnosti.

Promiskuiteta v spolnih odnosih, zanemarjanje pravil kontracepcije in posledično bolezni reproduktivnega sistema vplivajo tudi na sposobnost moškega, da spočeti otroka.

Tem dejavnikom lahko prištejemo še slabo okoljsko situacijo, stalni stres in visok psiho-čustveni stres, pomanjkanje minimalne telesne dejavnosti, škodljive delovne razmere.

Zahvaljujoč preiskavam bo zdravnik lahko ugotovil točen razlog, zakaj ne pride do zanositve po naravni poti, in bo tudi predpisal zdravljenje, ki bo odpravilo te dejavnike, izboljšalo kakovost sperme in obnovilo naravne funkcije moškega zdravja. Običajno takšno zdravljenje vključuje številne ukrepe: jemanje zdravil, fizioterapevtske postopke in spremembe življenjskega sloga.

Naloga bakteriološke kulture je ugotoviti razloge, zakaj ne pride do zanositve, ugotoviti morebitna vnetja, nalezljive bolezni in druge motnje v delovanju reproduktivnih sistemov bolnika.

Bakteriološka kultura ejakulata in spermograma

Pri izvajanju te študije je mogoče identificirati škodljive mikroorganizme, ki so prisotni v ejakulatu, pa tudi določiti občutljivost patogene mikroflore na določene vrste antibiotikov.

Bakterije in okužbe, prisotne v semenski tekočini, lahko povzročijo spremembe v strukturi ejakulata, to je spremembe v njegovi viskoznosti.

Ta pojav imenujemo viskoznost. Vzroki za njegov pojav: prostatitis, varikokela, orhitis, vnetni procesi v genitourinarnih organih moških. Pogosto so primeri, ko zdravnik ne more ugotoviti točnega vzroka teh sprememb, potem je diagnoza "idiopatska viskoznost".

Za pojasnitev diagnoze se skupaj z bakterijsko kulturo opravi tudi spermogram, ki potrdi ali ovrže "sindrom viskozne sperme". S tem pojavom se v telesu pojavijo motnje v delovanju notranjih spolnih organov, zaradi česar procesi, ki so odgovorni za redčenje semenske tekočine, ne potekajo pravilno.

Če je ejakulat preveč viskozen in gost, se semenčice v njem ne morejo prosto gibati, zmanjša se njihova hitrost gibanja, ne morejo doseči jajcevodov in so bolj dovzetne za vpliv okoljskih dejavnikov, okolja vagine in maternice. .

Opazite takšne kršitve brez klinična preskušanja nemogoče, saj lahko količina semenčic ostane enaka, vendar je sposobnost oploditve zelo nizka. Običajno viskoznost ejakulata ne sme biti višja od dveh centimetrov. Presežek postane osnova za diagnozo "viskoznosti".

Pri izvajanju spermograma se tako kot pri drugih preiskavah upoštevajo naslednji podatki in parametri semenske tekočine ter nekatere dodatne značilnosti: kakovost sperme, prisotnost ali odsotnost rdečih krvničk (običajno jih ne bi smelo biti), prisotnost ali odsotnost mukoznih oblik tekočine, kot tudi biokemični parametri .

Kdaj je predpisana bakteriološka kultura?

Kultura semenčic se izvaja vzporedno s preučevanjem značilnosti izločkov prostate. Ti postopki so predpisani vsem bolnikom, pri katerih zdravnik sumi na prisotnost vnetnega procesa.

Pregled je potreben za prepoznavanje nalezljivih bolezni in predpisovanje zdravljenja, ki lahko ustavi te procese in prepreči njihov prehod v akutno ali kronično fazo.

Študija identificira patogene mikroorganizme, ki lahko povzročijo bolezni na področju urologije ali povzročitelje spolno prenosljivih bolezni. To je ena izmed zelo občutljivih študij, ki so potrebne ne le za izbiro taktike zdravljenja z zdravili, ampak tudi za spremljanje zdravljenja.

Naravni ejakulat in reaktivne kisikove vrste

Eden od najnovejše metodeštudije semenske tekočine - študija naravne (čiste, nepredelane) sperme. Ta tehnika vam omogoča preučevanje ejakulata na podcelični ravni, zaradi česar se določijo različni nenormalni pojavi v celicah semenčic.

Za študijo se vzamejo "žive" sperme, oddane pod mikroskopom, kar jim omogoča 15-tisočkratno povečavo.

Za pravilno izvedbo študije je najbolje, da seme darujete neposredno na kliniki, kjer bo raziskava opravljena. Od trenutka zbiranja do začetka laboratorijske diagnostike ne sme preteči več kot ena ura. Druga zahteva pred izvedbo tega testa je popoln spolni mir nekaj dni pred obiskom laboratorija.

Kot pri drugih študijah, to analizo proučuje tako semenčico kot semenski izloček. Ti parametri morajo ustrezati zdravju prijaznim standardom. Torej, alkalno ravnovesje mora biti v območju od 7,2 do 7,8 pH, prostornina tekočine mora biti najmanj dva ml. Število semenčic v 1 ml je vsaj 20 milijonov, vsaj 50% jih mora imeti gibanje naprej.

Skupna prostornina celic z normalno morfološko strukturo ne sme biti manjša od tretjine celotnega števila.

Neaktivna in poškodovana sperma ne sme predstavljati več kot polovico količine pridobljenega semena. Če je vsaj eden od teh parametrov kršen, lahko govorimo o moški neplodnosti.

Obstajajo situacije, ko se v naravnem ejakulatu opazi prekomerna proizvodnja reaktivnih kisikovih spojin (ROS). ROS so glavni povzročitelji oksidativnih procesov v semenski tekočini. Vzroki za ta pojav so lahko bolezni reproduktivnega sistema, avtoimunske motnje v telesu in vplivi okolja.

Prav tako se proizvodnja ROS povečuje s starostjo bolnika, s kroničnimi boleznimi endokrinega sistema in s težkimi fizičnimi napori. Vse to vpliva na količino semenčic v ejakulatu in njihovo odsotnost zahtevana količina vodi v neplodnost.

Kako se pripraviti na test

Da bi pregled opravili pravilno in dobili najbolj natančne rezultate, se morate odgovorno pripraviti na darovanje ejakulata. Zbira se le v posebnih sterilnih posodah za enkratno uporabo, ki se izdajo na kliniki, ki izvaja takšne teste.

Prepovedana je uporaba kakršne koli steklene embalaže iz prehrambeni izdelki, kondomi, plastične vrečke itd.

Zelo pomembno je, da na posodi ne označite samo datuma odvzema ejakulata, temveč tudi točen čas. Od tega bo odvisna natančnost nekaterih kazalnikov, preučenih med diagnostičnim postopkom. Za izvedbo analize bi morali dati prednost kliniki, ki vam jo je priporočil zdravnik.

Ko je ejakulat zbran, ga je treba takoj odnesti v laboratorij. Shranjevanje zbranega biomateriala ni priporočljivo. Če pa to ni mogoče, posode ni treba postaviti v hladilnik.

Optimalna temperatura shranjevanja je od 20 do 40 stopinj. Pomanjkanje ustreznih pogojev shranjevanja lahko privede do napačnih rezultatov. Tudi nekaj dni pred analizo se morate odpovedati intimnim odnosom.

Rezultati testa so običajno pridobljeni v 24 urah od trenutka, ko je biomaterial oddan v laboratorij. Nastali obrazec z osebnimi podatki, osnovnimi parametri, standardi in proučevanimi indikatorji prejme pacient.

Dešifriranje prejetih podatkov opravi le zdravnik, ki je dal navodila za diagnozo. Postavi tudi končno diagnozo in predpiše zdravljenje. Včasih je poleg reproduktivnega specialista morda potrebno posvetovanje z drugimi strokovnjaki: urologom, venerologom, kirurgom, endokrinologom.

Na podlagi rezultatov laboratorijskih preiskav bo zdravnik ugotovil natančen vzrok neplodnosti in predpisal zdravljenje, katerega namen je povečati število aktivnih in zdravih semenčic v semenski tekočini. Toda poleg jemanja zdravil in različnih fizikalnih postopkov mora zdravljenje vključevati tudi druge parametre.

Naslednje bo pomagalo izboljšati kakovost sperme: zdrava slikaživljenje. Opustitev alkoholnih pijač in cigaret pomaga izboljšati rezultate testov v najkrajšem možnem času.

Ejakulat bo postal kakovostnejši, če bo v pacientovo življenje vključena tudi minimalna telesna aktivnost: jutranja telovadba, sprehodi, izogibanje dvigalu itd.

Če imate možnost obiskati fitnes centre, dajte prednost vadbi, ki ne bo povzročila prekomernega pregrevanja telesa. To je lahko plavanje, joga, raztezne vaje.

Premori med delom lahko povečajo tudi število aktivnih semenčic, če gre za dolgotrajno sedenje na enem mestu. Redni odmori vsako uro, med katerimi lahko pacient vstane in se sprehodi po sobi, ne bodo le dali počitka očem, temveč tudi izboljšali krvni obtok v medenici, kar neposredno vpliva na zdravje moških.

Če ne morete vstati, lahko naredite nekaj vaj sede.

Pomembno je, da se pravilno in redno prehranjujemo ter se izogibamo prigrizkom, zlasti nezdravi hrani. Da bi bil ejakulat bolj kakovosten, mora biti osnova prehrane beljakovinska in rastlinska hrana, pa tudi ribe in fermentirane mlečne pijače. Morate jesti redno, pogosto in v majhnih porcijah.

Izogibajte se nepotrebnemu stresu in čustvenemu stresu, ki neposredno vpliva tudi na zdravje moških.

Izogibanje obiskom krajev, kjer se temperatura dvigne: kopališče, plaža, bo pomagalo povečati količino sperme. Spodnje perilo, zlasti poleti, naj bo izdelano samo iz naravnih tkanin.

Sintetika poveča telesno temperaturo v dimljah, kar zmanjša kakovost sperme.

Takšni preprosti ukrepi bodo pomagali dopolniti zdravljenje, ki ga je predpisal lečeči specialist kratki roki izboljšati rezultate testov in hitro spočeti dolgo pričakovanega otroka.

Seksopatolog-androlog 1. kategorije. Vodja hersonske podružnice ukrajinskega združenja za načrtovanje družine.

-- [ stran 2 ] --

Slika 1. Najpogostejša patološka stanja pri moških iz neplodnih parov s prekomerno proizvodnjo ROS.

Na splošno je hiperprodukcija ROS po naših podatkih prisotna pri 38,2% bolnikov z razne motnje kakovost sperme. Pri moških s prekomerno produkcijo ROS smo najpogosteje ugotavljali varikokelo (38,9 % primerov) in kronični bakterijski prostatitis v fazi aktivnega vnetja (25,1 % primerov); 8,9% moških ima ciste v dodatkih, 1,2% jih ima odsotnost enega ali obeh semenovodov.

V 52,2% primerov smo v ozadju hiperprodukcije ROS odkrili avtoimunske reakcije proti spermi, ki jih je spremljala proizvodnja ASAT (slika 1).

V ozadju hiperprodukcije ROS je bila normospermija odkrita v 19,3% primerov. Tako smo ugotovili, da je oksidativni stres v 80,7 % primerov spremljalo poslabšanje kakovosti semenčic. Poleg tega so najpogosteje opazili astenozoospermijo - 71,4% primerov, nato teratozoospermijo - 36,3%, oligozoospermijo - 28,3%, piospermijo - 21,3%, imunsko neplodnost, ko je več kot polovica gibljive sperme prekrita s protitelesi - 10,6% ; v 5% primerov - azoospermija. Treba je opozoriti, da je običajno šlo za kombinacijo več diagnoz. Moteno akrosomsko reakcijo zaradi oksidativnega stresa so opazili v več kot polovici vseh primerov. Glede na visoko incidenco nekaterih patoloških stanj pri moških iz neplodnih parov je bila nujna naloga ugotoviti stopnjo tveganja za razvoj oksidativnega stresa glede na različne etiopatogenetske dejavnike (slika 2).

Ugotovili smo, da infekcijske in vnetne bolezni moških reproduktivnih organov, zlasti kronični bakterijski prostatitis, povzročijo oksidativni stres semenčic v 64,1 % primerov, relativno tveganje je 2,9. V ozadju imunske neplodnosti je absolutno tveganje za oksidativni stres 40,2-71,0%, relativno tveganje je 1,5-2,9 (odvisno od količine ASAT). Pri varikokeli je bilo absolutno tveganje za oksidativni stres sperme 29,3-68,1 %, relativno tveganje 1,6-2,6 oz.

Najpomembnejši vzroki za razvoj oksidativnega stresa so bili torej kronični bakterijski prostatitis v fazi aktivnega vnetja, avtoimunske reakcije proti semenčicam in varikokela. Ta patološka stanja so bila najpogosteje diagnosticirana pri moški neplodnosti in glede na njihovo ozadje je obstajalo veliko tveganje za razvoj oksidativnega stresa.

Proučevali smo značilnosti oksidativnega stresa v skupinah z različnimi vzroki zmanjšane plodnosti. Ugotovili smo, da je pri varikokeli (n=294) proizvodnja ROS 0,48+0,40 mV/s z individualnim razponom vrednosti od 0,01 do 66,15 mV/s, kar je 1,9-krat več kot pri plodnih bolnicah brez ASAT in 8-krat ob prisotnosti avtoimunskih reakcij.

Slika 2. Absolutno tveganje za oksidativni stres semenčic pod različnimi etiopatogenetskimi dejavniki moške neplodnosti . Opomba:*** - razlike v primerjavi s skupino plodnih moških so značilne glede na CI-kvadrat test s p<0,001

Hkrati korelacijska analiza ni pokazala povezave med resnostjo varikokele na eni strani in nivojem ROS v spermi na drugi strani (R=-0,004; gama=-0,004; t=-0,003; p>0,05).

Analizirali smo značilnosti proizvodnje ROS v ejakulatu moških med različne oblike varikokela. Ugotovljeno je bilo, da je bila hiperprodukcija aktivnih radikalov v subklinični obliki dilatacije žil semenčic opažena v 31,2% primerov, v prvem - 33,9%, v drugem - 25,5%, v 42,9% - v tretjem. Tako ni bilo ugotovljenih statistično značilnih razlik v incidenci prekomerne produkcije reaktivnih kisikovih spojin (p>0,05).

Na podlagi naših podatkov je ultrazvočni pregled skrotalnih organov obvezen pri pregledu moških iz neplodnih parov, da bi ugotovili subklinične oblike varikokele. Ugotovljena diagnoza varikokele je absolutna indikacija za določitev ravni ROS.

Po našem mnenju je glede na prekomerno proizvodnjo ROS pri varikokeli indicirano kirurško zdravljenje, ne glede na stopnjo varikokele.

Pri enaki stopnji dilatacije ven semenčične vrvice se je proizvodnja ROS povečevala z večanjem trajanja neplodnosti (p<0,04-0,01); в среднем по группам у пациентов с варикоцеле степенью +1 при продолжительности бесплодия от 12 до 36 мес. она составляла 0,39+0,23 мВ/с, при бесплодии больше 36 мес – 0,64+0,45 мВ/с (p<0,05). Исходя из этого, прогноз оперативного лечения в раннем возрасте в плане восстановления фертильности более благоприятный, а выжидательная тактика ведения пациентов с варикоцеле не является обоснованной, учитывая высокий риск оксидативного стресса.

V ozadju kroničnega prostatitisa (n=130) smo ugotovili neposredno odvisnost produkcije aktivnih kisikovih radikalov od števila levkocitov v izločku prostate (R=0,24; p=0,04). S povečanjem števila levkocitov v izločku prostate so v 36,1% primerov opazili piospermijo. Odvisnost produkcije ROS od koncentracije levkocitov v spermi (R=0,29; p<0,00001) сильнее, чем от содержания лейкоцитов в секрете простаты.

Bolnike z diagnozo piospermije je odlikovala visoka vsebnost ROS v spermi: v povprečju za skupino je bila proizvodnja 9,81+/-25,56 mV/s (z zavrnitvijo vrednosti +3S ​​- 1,15+1,34 mV/s) s posameznimi razpon od 0,07 do 153,50 mV/s; mediana – 0,925 mV/s, razpon ne-izstopajočih vrednosti – od 0,07 do 9,52 mV/s, kar je bistveno več (3,9-krat) kot pri plodnih moških (p<0,001).

Obstaja pomembna korelacija med koncentracijo levkocitov v spermi in resnostjo bakteriospermije (R = 0,23; p = 0,033), resnostjo bakteriospermije in proizvodnjo ROS (r = 0,35; p<0,01).

Na podlagi pridobljenih podatkov smo ugotovili pozitivno povezavo med produkcijo ROS in aglutinacijo semenčic pri moških iz neplodnih parov s patozoospermijo. Poleg tega se je pri izključitvi vzorcev s piospermijo korelacijski koeficient izrazito zmanjšal: R=0,13 (p>0,05), gama=0,30 (p=0,05).

Izključitev iz analize vzorcev s koncentracijo semenčic manj kot 10 milijonov / ml in izstopajočimi vrednostmi (+2S) je omogočila natančnejšo določitev proizvodnje ROS in aktivnosti avtoimunskih reakcij. V teh pogojih je pri moških s kroničnim prostatitisom, ki ga spremlja piospermija, proizvodnja ROS 8,8-krat večja kot pri plodnih moških in je bolj izrazita (R = 0,44) povezava med vsebnostjo ROS in levkocitov v spermi kot pri celoten vzorec.

Vlogo vnetnega procesa pri povečanju proizvodnje ROS v spermi potrjujejo rezultati antibiotične terapije kroničnega prostatitisa (tabela 1). Pokazalo se je, da se je po 2 tednih zdravljenja število levkocitov v izločku prostate zmanjšalo za 39,1 % (p<0,01) и на 35,2% в сперме (p>0,05) pride do več kot dvakratnega zmanjšanja proizvodnje ROS (-58,1 %; p<0,05). Одновременно происходит улучшение жизнеспособности (p<0,05) и подвижности (p<0,05), нормализация акросомальной реакции сперматозоидов в виде уменьшения доли гамет, преждевременно утративших целостность акросомальной мембраны (p<0,05), а у пациентов с АСАТ – снижение процента MAR-позитивных сперматозоидов (p<0,01).

Tako je analiza anketnih podatkov moških iz neplodnih parov s prostatitisom pokazala, da je povečano število levkocitov v semenu v ozadju prostatitisa glavni vir hiperprodukcije reaktivnih kisikovih vrst, kar vodi do oksidativnega stresa in sprememb funkcionalnih lastnosti sperme. .

Pri polovici (51,5 %) bolnikov iz neplodnih parov s piospermijo so ugotovili ASAT, le pri 9,2 % pa so zajeli več kot 50 % gibljivih semenčic.

Med koncentracijo levkocitov v semenčici in odstotkom ACAT-pozitivnih gibljivih semenčic ni korelacije (R=0,0; p>0,05).

Ugotovili smo, da je nastajanje prostih radikalov bolj odvisno od količine protiteles na semenčici (R = 0,81) kot od odstotka gibljivih MAP pozitivnih gamet (R = 0,44), določenega z metodo PCM, ki jo priporočamo kot bolj natančno označuje aktivnost avtoimunskih procesov v ejakulatu.

Analizirali smo značilnosti proizvodnje ROS pri različnih oblikah patospermije. Korelacijska analiza parametrov spermograma pri bolnikih s teratozoospermijo ni pokazala povezave med odstotkom patoloških oblik in proizvodnjo ROS. Vendar pa obstaja povezava med odstotkom semenčic s spremenjenim vratom in proizvodnjo ROS ter odsotnostjo ASAT: r=0,2; str<0,01. Также в этой выборке обнаружена положительная корреляция между продукцией АФК и процентом сперматозоидов, спонтанно претерпевших акросомальную реакцию: r=0,24; p<0,05 для группы пациентов с нормальной концентрацией сперматозоидов и лейкоцитов.

Povečanje ravni ROS pri teratozoospermiji je mogoče pojasniti s sproščanjem aktivnih radikalov s poškodbo membran semenčic, zadrževanjem citoplazme in, nasprotno, kar je najverjetneje posledica proizvodnje morfološko okvarjenih gamet. V tem primeru je normalen potek akrosomske reakcije moten in pride do apoptoze gamet s poškodbo celovitosti njihove DNK (Aitken et al., 1989; Saleh et al., 2003; Jedrzejczak et al., 2005; Deepinder F ., 2008).

Morfološko spremenjena sperma z okvarjeno DNK ima nizko sposobnost oploditve jajčeca in če pride do nosečnosti, je tveganje za genetske patologije ploda visoko.

Tabela 1

Spremembe v proizvodnji aktivnih kisikovih faktorjev, parametrov spermograma, akrosomalne reakcije, odstotka ACAT-pozitivnih semenčic in izločanja prostate med antibiotično terapijo kroničnega prostatitisa pri moških iz neplodnih parov (M + SE)

Indikatorji	Moški s prostatitisom(n=48)
	Pred zdravljenjem	Po 2 tednih zdravljenjeenia
Reaktivne kisikove spojine, mV/s	22,1+6,91	9,28+4,63**
Levkociti semenčic, x106/ml	2,07+0,52	1,34+0,58
Gibljiva sperma kategorija A, %	14,1+1,53	18,3+1,7*
Živa sperma, %	73,0+2,7	77,6+2,7*
Levkociti izločanja prostate, enote v vidnem polju	27,6+4,6	16,8+3,8**
MAR IgG-pozitivna sperma, %	31,8+6,93	26,1+6,51**
Prezgodnja akrosomska reakcija, %	23,3+2,57	18,1+2,21*
Povzročena akrosomska reakcija, %	32,9+3,14	31,7+2,83
Inducibilnost akrosomske reakcije, %	8,8+2,6	13,6+2,3

1 Sistemski eritematozni lupus (SLE) je klasična avtoimunska bolezen, v patogenezi katere ima vodilno vlogo hiperprodukcija citotoksičnih avtoprotiteles proti DNA, tvorba imunskih kompleksov z njihovo kasnejšo fiksacijo pod bazalno membrano povrhnjice in v stene majhnih žil, pa tudi procese apoptoze. Pri razvoju organskih poškodb pri tej bolezni je še posebej pomembno povečanje proizvodnje reaktivnih kisikovih spojin (ROS) s fagociti, ki imajo visok histodestruktivni učinek. V dostopni literaturi nismo zasledili dela o značilnostih produkcije reaktivnih kisikovih spojin (ROS) s ključnimi celicami akutnega in kroničnega vnetnega procesa - krožečimi nevtrofilci in monociti pri artikularnem sindromu pri bolnikih s SLE.

Proučevali smo proizvodnjo ROS z nevtrofilci (Nf) in monociti (Mn) z uporabo od luminola odvisnih in lucigenin odvisnih (spontanih in povzročenih z ubitim stafilokokom) kemiluminiscenčnih (CL) testov, ki odražajo proizvodnjo zelo toksičnih reaktivnih kisikovih vrst (ROS) v sistemu mieloperoksidaze in superoksidnega aniona pri 66 bolnikih s SLE ter pri 22 zdravih darovalcih. Povprečna starost bolnikov s SLE je bila 41,4 ± 10,9 let, trajanje procesa je bilo 11 ± 4 leta. Najmanjša stopnja aktivnosti vnetnega procesa (A1) je bila diagnosticirana pri 41 bolnikih (62,1%), zmerna (AII) - pri 25 (37,9%). Akutni potek bolezni se je pojavil pri nekaj bolnikih (podatki o njihovem pregledu niso vključeni v to delo), subakutni potek - pri 38 (57,6%), kronični - pri 28 (42,4%). Artikularni sindrom pri SLE se je pojavil pri 49 bolnikih (74,2 %).

Pri bolnikih s SLE, tako v prisotnosti kot v odsotnosti poškodbe sklepov, je bila proizvodnja ROS, tako Nf kot Mn, glede na teste spontanega CL, odvisnega od lucigenina in luminola, povečana v primerjavi s kazalniki kontrolne skupine, označene s proizvodnjo širokega spektra ROS, vključno z zelo strupenimi, z močnim histodestruktivnim učinkom. Za inducirane teste CL je bila značilna variabilnost, koeficienti aktivacije fagocitov pri obeh oblikah eritematoznega lupusa so bili na splošno zmanjšani, kar kaže na zmanjšanje rezervnih funkcij krožečih fagocitov.

Pri primerjavi proučevanih parametrov pri bolnikih s SLE, odvisno od prisotnosti ali odsotnosti sklepnega sindroma, je bilo ugotovljeno zmanjšanje induciranega od lucigenina odvisnega CL Nf in spontanega od luminola odvisnega CL Nf pri bolnikih s sklepnimi lezijami v primerjavi s podobnimi podatki v skupini bolnikov s SLE brez poškodb sklepov.

Izvedene študije kažejo na povečano proizvodnjo ROS s krožečimi fagociti pri SLE, ne glede na to, ali so sklepne lezije prisotne ali odsotne. Hkrati razvoj sklepnih lezij pri bolnikih s SLE spremlja zmanjšanje nekaterih kazalcev oksidativnega stresa nevtrofilcev, kar kaže na raznolikost manifestacij oksidativnega stresa fagocitov, odvisno od kliničnih manifestacij, zlasti od razvoja sklepov. lezije.

Delo je bilo predstavljeno na II. znanstveni konferenci študentov, mladih znanstvenikov in strokovnjakov z mednarodno udeležbo "Sodobni problemi znanosti in izobraževanja", 19. in 26. februarja 2005. Hurgada (Egipt)

Bibliografska povezava

Romanova N.V. PROIZVODNJA AKTIVNIH VRTČK KISIKA S KROŽEČIMI FAGOCITI IN ARTIKULARNI SINDROM PRI SISTEMSKEM ERITEMATOZNEM LUPUSU // Napredek sodobne naravoslovne znanosti. – 2005. – št. 3. – Str. 116-116;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=8239 (datum dostopa: 30.01.2020). Predstavljamo vam revije, ki jih je izdala založba "Akademija naravoslovnih znanosti"