Съвременни проблеми на науката и образованието. Напредък в съвременната естествена наука Производство на AFC в еякулата чрез измити сперматозоиди

Специални свойства на молекулата на кислорода и нейните продукти на трансформация

Целенасочено производство на ROS от живи клетки

Целенасочено производство на ROS от живи клетки

Всички организми са оборудвани с различни механизми за целевото генериране на ROS. Отдавна е известно, че ензимът NADPH оксидаза активно произвежда „токсичен“ супероксид, който генерира целия диапазон от ROS. Но доскоро се смяташе за специфично свойство на фагоцитните клетки на имунната система, обяснявайки необходимостта от производство на ROS като критично обстоятелство за защита срещу патогенни микроорганизми и вируси. Сега стана ясно, че този ензим е повсеместен. Той и подобни ензими се намират в клетките на трите слоя на аортата, във фибробластите, синоцитите, хондроцитите, растителните клетки, дрождите, бъбречните клетки, невроните и астроцитите на мозъчната кора O 2 - á произвеждат други повсеместни ензими: NO синтаза , цитохром P-450, гама-глутамил транспептидаза и списъкът продължава да расте. Наскоро беше открито, че всички антитела са способни да произвеждат H 2 O 2, т.е. те също са ROS генератори. Според някои оценки, дори в покой, 10-15% от общия кислород, консумиран от животните, претърпява редукция с един електрон, а при стресови условия, когато активността на ензимите, генериращи супероксид, се увеличава рязко, интензивността на редукция на кислорода се увеличава с друг 20%. По този начин ROS трябва да играе много важна роля в нормалната физиология.

Андрологична лаборатория

Спермограма според СЗО 2010 г 1607 p.

Антиспермални антитела върху сперматозоидите (Mar тест индиректен Ig G) 1928 p.

Антиспермални антитела върху сперматозоидите (Mar тест индиректен Ig A) 1928 p.

Антиспермални антитела върху спермата (Mar тест директен Ig G) 1499 рубли

Антиспермални антитела върху сперматозоиди (Mar тест директен Ig A) 1499 рубли

Посткоитален тест (in vivo тест) 2142 p.

Тест на Kurzrock Miller 2142 p.

Клиничната андрологична лаборатория извършва специални изследвания за мъже

Всички момчета преминават медицински преглед в училище, преди да постъпят в армията. Това помага да се идентифицират различни нарушения, включително тези, свързани с репродуктивно здраве. Рядко се случва млад мъж впоследствие по своя инициатива да се консултира с лекар за профилактика. По принцип те идват за преглед, когато вече има оплаквания, било по инициатива на партньор, или в законен брак, когато не могат да заченат дете в продължение на няколко години.

Във всички тези случаи, както за превенция, така и при наличие на различни проблеми, нашата задача е да оценим обективно ситуацията, да изберем правилно списъка с необходимите изследвания, да проведем изследвания и да изпратим резултатите на електронна пощатърпелив. В бъдеще, ако е необходимо, пациентът може да обсъди данните от тези изследвания с уролог-андролог или гинеколог-репродуктолог, които работят в нашата клиника.

Основната област на работа на клиничната андрологична лаборатория е мъжкото безплодие и комбинираните форми на мъжко и женско безплодие, както и инфекциозни и възпалителни процеси пикочно-половата системамъже.

Персоналът на лабораторията - лекари, медицински технолози, лаборанти - работят заедно от 6 години и са водещи специалисти по сперматология у нас. Много от тях имат опит в работата Научен центъракушерство и гинекология на името на. V.I. Kulakov, Клиника по урология на името на. R.M.Fronshtein от Първия Московски държавен медицински университет на името на. ТЯХ. Сеченов, андрологична клиника Руски университетПриятелство между народите. Лабораторните изследвания, извършени от нашите служители, са в основата на много научни трудовепо андрология, дисертации и публикации, вкл. във водещи англоезични списания.

Квалификацията, необходимото оборудване и дългогодишният опит ни позволяват да извършваме различни сперматозоиди на експертно ниво.

Анализите се извършват точно според всички изисквания на WHO 2010.

Най-модерните са въведени в клиничната практика съвременни методиоценка на функцията на сперматозоидите: оксидативен стрес, акрозомна реакция, фрагментация на ДНК, нарушения на пакетирането на хроматина и др.

Всички анализи се правят точно тук в лабораторията, не се транспортират никъде, веднага щом материалът се втечни.

Има отлични условия за даряване на сперма: отделна звукоизолирана стая с тоалетна и мивка, голям телевизор. Стаята за даряване на сперма се намира непосредствено до лабораторията.

Изследване на еякулат (сперма) - основни изисквания

Изследването на спермата - концентрация, подвижност и морфология на сперматозоидите, съдържание на левкоцити, антиспермални антитела, увреждане на ДНК и много други функционални показатели - е основният метод за оценка на мъжкия фертилитет.

Въпреки внедряването компютърна технология, изследването на спермата, извършено от опитен лаборант, все още е най-точният, надежден и възпроизводим диагностичен метод.

Изследването на сперматозоидите трябва да се извършва в специализирани лаборатории, а не в общи лаборатории (особено не в мрежови лаборатории), тъй като описанието на повечето параметри на спермограмата - подвижност, морфология, MAP тест и др. - е субективно и зависи критично от опит и квалификация лабораторен лекар В идеалния случай динамичният анализ на спермата трябва да се извършва от един специалист, тъй като дори при строг вътрешен контрол на качеството в лабораторията могат да възникнат несъответствия в резултатите, когато анализът се извършва от различни лекари.

Спермата е сложен материал. Повишен вискозитет, дефектна доставка, наличие на левкоцити, незрели сперматозоиди, бактерии, различни категориимобилността може да бъде правилно определена само от лекар с богат опит. Отзад напоследъкСтандартите на СЗО за изследване на спермата са се променяли няколко пъти и различните лаборатории имат различни референтни стойности. Необходимо е също така да се вземат предвид сезонните колебания в параметрите на спермограмата, състоянието на пациента при този момент, неговите психологически характеристики.

Спермата за анализ трябва да се дарява след сексуално въздържание от 2 до 7 дни, за предпочитане по-близо до обичайния ритъм на сексуална активност.Избягвайте алкохола, не се разболявайте, не вземайте пара, не вземайте гореща вана, бъдете здрави.

Ако параметрите на спермограмата се отклоняват от нормалните по време на първоначалния преглед, анализът трябва да се повтори след 2-6 седмици, за да се потвърди диагнозата.Тъй като сперматогенезата - процесът на образуване на зряла сперматогенеза - отнема почти 3 месеца, всеки отрицателно въздействие(треска, стрес, отравяне и т.н.) могат да повлияят на качеството на спермата през това време.

Необходимо е да се разбере, че дори при голям брой сперматозоиди и добра подвижност, те може да не изпълнят основната си функция - оплождането на яйцеклетката, защото има „разбивка“ на друго ниво. По последни данни, до 30% от случаите на мъжко безплодие възникват с „нормозооспермия“ - формално нормална спермограма.Установяването на мъжкия фактор на безплодие в този случай изисква използването на специални функционални тестове.

Основните тестове за поставяне на диагноза „фертилен“ или „безплоден“ (могат ли да имат деца или не) в момента са:

Спермограма - определяне на обема, вискозитета, pH на сперматозоидите, концентрацията, подвижността и морфологията на сперматозоидите, тяхната аглутинация, броя на левкоцитите и редица други параметри.

MAR тестът е тест за наличие на антиспермални антитела (АСАТ), водещи до имунно безплодие. Има ACAT от клас IgG и клас IgA, които имат свои собствени характеристики.

Реактивни кислородни видове (ROS или ROS)в нативен еякулат (сперма) и промита сперма. Увеличаване на производството активни формикислородът в нативния еякулат е чувствителен маркер за инфекциозно-възпалителния процес (по-чувствителен от броя на левкоцитите). Производството на ROS от измита сперма е признак на оксидативен стрес в зародишните клетки, при който дори хромозомите са засегнати. Оксидативният стрес на спермата е причина не само за мъжкото безплодие, но и за спонтанен аборт и вродени аномалии при децата.

Тези три анализа ще помогнат за поставяне на правилната диагноза, ще очертаят начини за по-нататъшно лечение или ще определят необходимостта от допълнителни изследвания, ако бъдат открити нарушения.

Трябва да се отбележи, че всеки ден млади мъже идват да вземат спермограма и дори не подозират за наличието на гноен процес, когато има голям бройлевкоцити. Това може да доведе до по-нататъшно блокиране на семепровода и в резултат на това сперматозоидите не излизат или, още по-лошо, процесът на тяхното образуване е нарушен. В резултат на това диагностиката на мъжкия фертилитет и инфекциозния процес в нашата лаборатория са неразделни. Само в оцветени намазки могат да се видят и разграничат левкоцитите и незрелите клетки на сперматогенезата на различни етапи на развитие. И ако се открие гноен процес, тогава спермата може незабавно да се изследва за полово предавани инфекции и да се направи бактериална култура за аероби и анаероби. Трябва също така да разберете, че възпалението може да се открие в семенната течност, но секретът на простатата ще бъде нормален, и обратното, може да има възпаление в секрета на простатата, но спермата ще бъде нормална. Инфекциите, предавани по полов път, се изследват от изстъргване от уретрата, за това пациентът не трябва да уринира повече от три часа. Мъже от всички възрасти идват при нас за изследвания, за да се установи адекватна диагноза на простатит.

Имайки предвид начина на живот на съвременния млад мъж - ранен полов живот, голям брой сексуални партньори, секс без бариерна контрацепция, заседнал начин на живот, стрес - препоръчваме профилактичен преглед не само за инфекции, но и спермограма за проследяване на раждането. на здраво потомство.

Семенната течност на мъжете, по-известна като сперма, в медицината се нарича еякулат. Това е естествена течност, секретирана от тестисите, която има характерна мукозна структура, вискозна и непрозрачна.

Освобождаването на еякулат възниква поради сексуална възбуда по време на полов акт или мастурбация. Еякулатът има специфична миризма, подобна на аромата на кестен и е светъл, почти бял на цвят.

Вкусът на течността зависи от храните, които човек яде и общото му здравословно състояние. При здрави мъже има леко солен вкус с горчив оттенък. Като всяка течност човешкото тяло, еякулатът може да се изследва в лабораторни условия, за да се оцени здравословното състояние на пациента.

Анализът на еякулата се извършва по два начина: бактериологична култура и спермограма.

Основни характеристики на спермата

По време на полов акт или мастурбация се отделя малко количество семенна течност, чийто обем зависи от няколко фактора. Според медицинските стандарти трябва да е между два и десет милилитра.

Въпреки това, при възрастни мъже количеството на сперматозоидите може да бъде по-малко, обемът им намалява с всеки полов акт, след кратки интервали от време. Затова лекарите често се фокусират върху нормалните граници от два до пет милилитра.

Много често представителите на силния пол приемат намаляването на количеството отделена сперма като тревожен знак, показващ влошаване на мъжката сила и здраве. В млада възраст мъжете вярват, че колкото повече сперматозоиди се отделят по време на еякулация, толкова по-голям е ефектът върху техния сексуален партньор.

Всъщност количеството отделен еякулат и неговото качество са две напълно различни неща. Големият обем сперматозоиди не винаги е показател за висока плодовитост. Но основното в еякулата е броят на здравите и активни сперматозоиди, способни да достигнат до яйцеклетката и да я оплодят.

Тази оплождаща способност на спермата се изчислява в лабораторни условия. Според изследвания 1 милилитър сперма трябва да съдържа от 20 до 25 милиона здрави сперматозоиди.

Самият еякулат се състои от семенна плазма и оформени елементи. Последните включват не само сперматозоиди, но и гоноцити. Семената плазма е основата на спермата, отговорна за нейната правилна структура. Изпъква, ако всички вътрешни мъжки органи работят правилно и хармонично. Възможно е да се прецени колко здрава е семенната течност само чрез провеждане на лабораторни изследвания.

Спермокултура и спермограма се предписват на пациентите в следните случаи.

1. Безплодие. Тази диагноза се поставя на семейни двойки, които в рамките на една година активна сексуална активност не са успели да заченат дете сами.
2. Като преглед преди процедурата по ин витро оплождане.
3. Ако подозирате възможна загуба на свойствата на спермата поради предишни заболявания или наранявания на гениталните органи (инфекциозни заболявания, хормонален дисбаланс, варикоцеле и др.).
4. Като профилактичен преглед по желание на пациента.
5. Изследването на еякулата е част от задължителната диагностика, когато семейна двойка планира да зачене дете.

Основната задача обаче това учение- това е определението на причината, която пречи на мъжа да стане баща, тоест безплодието. Изследването на еякулата помага да се установят причините за намаляването на обема на секретираната течност и намаляването на броя на активните сперматозоиди.

Тези тестове ще определят възможните възпаления и инфекции, които са засегнали пациента, което ще помогне да започне не само лечението на безплодието, но и други заболявания, както и да увеличи броя на активните сперматозоиди.

Спермокултурата е една от най-често извършваните диагностики, предписани за изследване на здравето на мъжете. Диагнозата безплодие все по-често се поставя на напълно здрави млади хора, които не се оплакват от други аспекти на здравето си. Какво води до развитието на това заболяване?

На първо място, вината е на пациента. Нездравословен начин на живот, лоши навици, неправилно хранене - всичко това води до хормонален дисбаланс в организма, което води до намаляване на броя на здравите сперматозоиди и тяхната активност.

Промискуитетът в сексуалните отношения, пренебрегването на правилата за контрацепция и в резултат на това заболяванията на репродуктивната система също влияят върху способността на мъжа да зачене дете.

Към тези фактори можем да добавим лошата екологична ситуация, постоянен стреси висок психо-емоционален стрес, липса на минимална физическа активност, вредни условия на труд.

Благодарение на тестовете лекарят ще може да определи точната причина, поради която зачеването не настъпва естествено, а също така ще предпише лечение, което ще премахне тези фактори, ще подобри качеството на спермата и ще възстанови естествените функции на мъжкото здраве. Обикновено такова лечение включва редица мерки: приемане на лекарства, физиотерапевтични процедури и промени в начина на живот.

Задачата на бактериологичната култура е да се определят причините, поради които не настъпва зачеването, да се идентифицират възможни възпаления, инфекциозни заболявания и други дисфункции на репродуктивната система на пациента.

Бактериологична култура на еякулат и спермограма

При провеждането на това изследване е възможно да се идентифицират вредните микроорганизми, присъстващи в еякулата, както и да се определи чувствителността на патогенната микрофлора към определени видове антибиотични лекарства.

Бактериите и инфекциите, присъстващи в семенната течност, могат да причинят промени в структурата на еякулата, тоест промени в неговия вискозитет.

Това явление се нарича вискозитет. Причини за появата му: простатит, варикоцеле, орхит, възпалителни процеси в пикочно-половите органи на мъжете. Често има случаи, когато лекарят не може да определи точната причина за тези промени, тогава диагнозата е "идиопатичен вискозитет".

За изясняване на диагнозата заедно с бактериална култура се извършва и спермограма, която потвърждава или опровергава „синдрома на вискозна сперма“. При това явление в тялото възникват нарушения във функционирането на вътрешните полови органи, в резултат на което процесите, отговорни за разреждането на семенната течност, не протичат правилно.

Ако еякулатът е твърде вискозен и плътен, тогава сперматозоидите не могат да се движат свободно в него, скоростта им на движение намалява, те стават неспособни да достигнат до фалопиевите тръби и са по-податливи на влиянието на факторите на околната среда, средата на вагината и матката. .

Забележете подобни нарушения без клинични изпитванияневъзможно, тъй като обемът на спермата може да остане същият, но способността за оплождане е много ниска. Обикновено вискозитетът на еякулата не трябва да бъде по-висок от два сантиметра. Излишъкът става основа за диагнозата "вискозитет".

При извършване на спермограма се вземат предвид следните данни и параметри на семенната течност, както и при други изследвания, както и някои допълнителни характеристики: качество на сперматозоидите, наличие или отсъствие на червени кръвни клетки (обикновено те не трябва да присъстват), наличие или отсъствие на мукозни форми на течност, както и биохимични параметри.

Кога се предписва бактериологична култура?

Спермокултурата се извършва паралелно с изследването на характеристиките на простатния секрет. Тези процедури се предписват на всички пациенти, при които лекарят подозира наличието на възпалителен процес.

Изследването е необходимо, за да се идентифицират инфекциозни заболявания и да се предпише лечение, което може да спре тези процеси и да предотврати преминаването им в остри или хронични стадии.

Изследването идентифицира патогенни микроорганизми, които могат да причинят заболявания в областта на урологията или да причинят болести, предавани по полов път. Това е едно от високочувствителните изследвания, необходими не само за избор на тактиката на лекарствената терапия, но и за наблюдение на лечението.

Природен еякулат и реактивни кислородни видове

Един от най-новите методиизследвания на семенна течност - изследване на нативна (чиста, непреработена) сперма. Тази техника ви позволява да изследвате еякулата на субклетъчно ниво, в резултат на което се определят различни анормални явления, присъстващи в сперматозоидите.

За изследване се вземат „живи“ сперматозоиди, излъчени под микроскоп, което им позволява да бъдат увеличени 15 хиляди пъти.

За да проведете правилно изследването, най-добре е да дарите сперма директно в клиниката, където ще се проведе изследването. От момента на вземане до началото на лабораторната диагностика не трябва да мине повече от един час. Друго изискване преди провеждането на този тест е пълната полова почивка няколко дни преди посещението в лабораторията.

Както при други проучвания, този анализизучава както самите сперматозоиди, така и семенната секреция. Тези параметри трябва да отговарят на здравословните стандарти. Така, алкален баланстрябва да бъде в диапазона от 7,2 до 7,8 pH, обемът на течността трябва да бъде най-малко два ml. Броят на сперматозоидите в 1 ml е най-малко 20 милиона, като поне 50% от тях трябва да имат движение напред.

Общият обем на клетките с нормална морфологична структура не трябва да бъде по-малък от една трета от общия брой.

Неактивните и повредени сперматозоиди не трябва да представляват повече от половината от обема на получената сперма. Ако поне един от тези параметри е нарушен, можем да говорим за мъжко безплодие.

Има ситуации, при които се наблюдава прекомерно производство на реактивни кислородни видове (ROS) в естествения еякулат. ROS са основните причинители на окислителните процеси в семенната течност. Причините за това явление могат да бъдат заболявания на репродуктивната система, автоимунни нарушения на тялото и влияние на околната среда.

Също така производството на ROS се увеличава с възрастта на пациента, с хронични заболявания на ендокринната система и с тежки физически натоварвания. Всичко това влияе върху обема на сперматозоидите в еякулата и тяхното отсъствие необходимо количествоводи до безплодие.

Как да се подготвим за теста

За да проведете правилно изследването и да получите най-точните резултати, трябва отговорно да се подготвите за даряването на еякулат. Събира се само в специални стерилни контейнери за еднократна употреба, които се издават в клиниката, провеждаща такива изследвания.

Забранено е използването на стъклени съдове от хранителни продукти, презервативи, найлонови торбички и др.

Много е важно върху контейнера да се отбележи не само датата на събиране на еякулата, но и точно време. От това ще зависи точността на някои показатели, изследвани по време на диагностичния процес. За да извършите анализа, трябва да дадете предпочитание на клиника, препоръчана от Вашия лекар.

След като се вземе еякулата, той трябва незабавно да се занесе в лабораторията. Не е препоръчително събраният биоматериал да се съхранява. Но ако това не е възможно, не е необходимо контейнерът да се поставя в хладилника.

Оптималната температура на съхранение е от 20 до 40 градуса. Липсата на подходящи условия за съхранение може да доведе до грешни резултати. Също така няколко дни преди анализа трябва да се откажете от интимни отношения.

Резултатите от изследването обикновено се получават в рамките на 24 часа от момента на предаване на биоматериала в лабораторията. Полученият формуляр с лични данни, основни параметри, стандарти и изследвани показатели се дава на пациента.

Декодирането на получените данни се извършва само от лекуващия лекар, който е дал насока за диагнозата. Той също така поставя окончателна диагноза и предписва лечение. Понякога, в допълнение към репродуктивния специалист, може да се наложи консултация с други специалисти: уролог, венеролог, хирург, ендокринолог.

Въз основа на резултатите от лабораторните изследвания лекарят ще определи точната причина за безплодието и ще предпише лечение, предназначено да увеличи броя на активните и здрави сперматозоиди в семенната течност. Но освен приема на лекарства и различни физически процедури, лечението трябва да включва и други параметри.

Следното ще помогне за подобряване на качеството на спермата: здрав образживот. Отказът от алкохолни напитки и цигари помага за подобряване на резултатите от теста в най-кратки срокове.

Еякулатът ще стане по-качествен, ако в живота на пациента се включи дори минимална физическа активност: сутрешна гимнастика, разходки, избягване на асансьора и др.

Ако имате възможност да посетите фитнес центрове, трябва да дадете предпочитание на тренировки, които няма да доведат до прекомерно прегряване на тялото. Това може да бъде плуване, йога, упражнения за разтягане.

Почивките в работата също могат да увеличат броя на активните сперматозоиди, ако включват седене на едно място за дълго време. Редовните почивки на всеки час, през които пациентът може да стане и да се разхожда из стаята, не само ще осигурят почивка на очите, но и ще подобрят кръвообращението в таза, което пряко засяга здравето на мъжете.

Ако не можете да се изправите, можете да направите няколко упражнения, докато седите.

Важно е да се храните правилно и редовно и да избягвате леки закуски, особено нездравословна храна. За да бъде еякулатът с по-високо качество, основата на диетата трябва да бъде протеинова и растителна храна, както и риба и ферментирали млечни напитки. Трябва да се храните редовно, често и на малки порции.

Трябва да избягвате излишния стрес и емоционалния стрес, които също пряко засягат здравето на мъжете.

Избягването на посещение на места, където има повишаване на температурата: баня, плаж ще помогне за увеличаване на обема на спермата. Бельото, особено през лятото, трябва да бъде само от естествени материи.

Синтетиката повишава телесната температура в слабините, което намалява качеството на спермата.

Такива прости мерки ще помогнат за допълване на лечението, предписано от лекуващия специалист, до повече кратко времеподобряване на резултатите от тестовете и бързо зачеване на дългоочаквано бебе.

Сексопатолог-андролог от 1-ва категория. Ръководител на Херсонския клон на Украинската асоциация за семейно планиране.

-- [ Страница 2 ] --

Фиг. 1. Най-честите патологични състояния при мъже от безплодни двойки със свръхпроизводство на ROS.

Като цяло свръхпроизводството на ROS, според нашите данни, е налице при 38,2% от пациентите с различни разстройствакачество на спермата. Сред мъжете със свръхпроизводство на ROS най-често идентифицирахме варикоцеле (38,9% от случаите) и хроничен бактериален простатит във фазата на активно възпаление (25,1% от случаите); 8,9% от мъжете имат кисти в придатъците, 1,2% имат липса на един или двата семепровода.

В 52,2% от случаите, на фона на хиперпродукцията на ROS, открихме автоимунни реакции срещу сперматозоиди, придружени от производството на ASAT (фиг. 1).

На фона на хиперпродукцията на ROS, нормоспермията се открива в 19,3% от случаите. Така установихме, че оксидативният стрес в 80,7% от случаите е придружен от влошаване на качеството на спермата. Освен това най-често се наблюдава астенозооспермия - 71,4% от случаите, след това тератозооспермия - 36,3%, олигозооспермия - 28,3%, пиоспермия - 21,3%, имунно безплодие, когато повече от половината от подвижните сперматозоиди са покрити с антитела - 10,6% ; в 5% от случаите - азооспермия. Трябва да се отбележи, че обикновено имаше комбинация от няколко диагнози. Нарушена акрозомна реакция поради оксидативен стрес е отбелязана в повече от половината от всички случаи. Като се има предвид високата честота на някои патологични състояния при мъже от безплодни двойки, спешна задача беше да се установи степента на риск от развитие на оксидативен стрес на фона на различни етиопатогенетични фактори (фиг. 2).

Установихме, че инфекциозни и възпалителни заболявания на мъжките репродуктивни органи, по-специално хроничен бактериален простатит, водят до оксидативен стрес на спермата в 64,1% от случаите, относителният риск е 2,9. На фона на имунното безплодие абсолютният риск от оксидативен стрес е 40,2-71,0%, относителният риск е 1,5-2,9 (в зависимост от количеството на ASAT). При варикоцеле абсолютният риск от оксидативен стрес на спермата е 29,3-68,1%, относителният риск е съответно 1,6-2,6.

По този начин най-значимите причини за развитието на оксидативен стрес са хроничният бактериален простатит във фазата на активно възпаление, автоимунни реакции срещу сперматозоиди и варикоцеле. Тези патологични състояния най-често се диагностицират при мъжко безплодие и на фона им съществува висок риск от развитие на оксидативен стрес.

Изследвахме характеристиките на оксидативния стрес в групи с различни причини за намалена плодовитост. Установихме, че при варикоцеле (n=294) производството на ROS е 0,48+0,40 mV/s с индивидуален диапазон от стойности от 0,01 до 66,15 mV/s, което е 1,9 пъти по-високо от това на фертилни пациенти при липса на ASAT и 8 пъти при наличие на автоимунни реакции.

Фиг.2.Абсолютен риск от оксидативен стрес на спермата при различни етиопатогенетични фактори на мъжкото безплодие . Забележка:*** - разликите в сравнение с групата на фертилните мъже са значими според CI-квадрат теста с p<0,001

В същото време корелационният анализ не разкрива връзка между тежестта на варикоцеле, от една страна, и нивото на ROS в спермата, от друга (R=-0.004; гама=-0.004; t=-0.003; р>0,05).

Анализирахме характеристиките на производството на ROS в еякулата на мъжете по време на различни формиварикоцеле. Установено е, че хиперпродукцията на активни радикали в субклиничната форма на дилатация на вените на семенната връв се наблюдава в 31,2% от случаите, в първия - 33,9%, във втория - 25,5%, 42,9% - в третия. По този начин не са открити статистически значими разлики в случаите на свръхпроизводство на реактивни кислородни видове (p>0,05).

Въз основа на нашите данни ултразвуковото изследване на скроталните органи е задължително при изследване на мъже от безплодни двойки, за да се идентифицират субклинични форми на варикоцеле. Установената диагноза варикоцеле е абсолютна индикация за определяне нивото на ROS.

Според нас на фона на свръхпроизводството на ROS при варикоцеле е показано хирургично лечение, независимо от степента на варикоцеле.

При същата степен на дилатация на вените на семенната връв, производството на ROS нараства с увеличаване на продължителността на безплодието (p<0,04-0,01); в среднем по группам у пациентов с варикоцеле степенью +1 при продолжительности бесплодия от 12 до 36 мес. она составляла 0,39+0,23 мВ/с, при бесплодии больше 36 мес – 0,64+0,45 мВ/с (p<0,05). Исходя из этого, прогноз оперативного лечения в раннем возрасте в плане восстановления фертильности более благоприятный, а выжидательная тактика ведения пациентов с варикоцеле не является обоснованной, учитывая высокий риск оксидативного стресса.

На фона на хроничен простатит (n=130) установихме пряка зависимост на продукцията на активни кислородни радикали от броя на левкоцитите в простатния секрет (R=0,24; p=0,04). При увеличаване на броя на левкоцитите в секрета на простатата се наблюдава пиоспермия в 36,1% от случаите. Зависимост на производството на ROS от концентрацията на левкоцити в сперматозоидите (R=0,29; p<0,00001) сильнее, чем от содержания лейкоцитов в секрете простаты.

Пациентите, диагностицирани с пиоспермия, се отличават с високо съдържание на ROS в сперматозоидите: средно за групата продукцията е 9,81+/-25,56 mV/s (с отхвърляне на +3S стойности - 1,15+1,34 mV/s) с индивидуални разпространение от 0,07 до 153,50 mV/s; медиана – 0,925 mV/s, диапазон на неизвънредни стойности – от 0,07 до 9,52 mV/s, което е значително повече (3,9 пъти), отколкото при фертилни мъже (p<0,001).

Има значителна корелация между концентрацията на левкоцити в спермата и тежестта на бактериоспермията (R = 0,23; p = 0,033), тежестта на бактериоспермията и производството на ROS (r = 0,35; p<0,01).

Въз основа на получените данни установихме положителна връзка между производството на ROS и аглутинацията на сперматозоидите при мъже от безплодни двойки с патозооспермия. Освен това, когато се изключат проби с пиоспермия, коефициентът на корелация намалява значително: R=0.13 (p>0.05), Gamma=0.30 (p=0.05).

Изключването от анализа на проби с концентрация на сперматозоиди по-малко от 10 милиона / ml и извънредни стойности (+2S) направи възможно по-точното определяне на производството на ROS и активността на автоимунните реакции. При тези условия, при мъже с хроничен простатит, придружен от пиоспермия, производството на ROS е 8,8 пъти по-голямо, отколкото при фертилни мъже, и има по-изразена (R = 0,44) връзка между съдържанието на ROS и левкоцитите в спермата, отколкото при цяла извадка.

Ролята на възпалителния процес за увеличаване на производството на ROS в сперматозоидите се потвърждава от резултатите от антибиотичната терапия при хроничен простатит (Таблица 1). Показано е, че след 2 седмици лечение броят на левкоцитите в секрета на простатата намалява с 39,1% (p<0,01) и на 35,2% в сперме (p>0,05) има повече от два пъти намаление в производството на ROS (-58,1%; p<0,05). Одновременно происходит улучшение жизнеспособности (p<0,05) и подвижности (p<0,05), нормализация акросомальной реакции сперматозоидов в виде уменьшения доли гамет, преждевременно утративших целостность акросомальной мембраны (p<0,05), а у пациентов с АСАТ – снижение процента MAR-позитивных сперматозоидов (p<0,01).

По този начин анализът на данните от проучването на мъже от безплодни двойки с простатит показа, че повишеният брой левкоцити в спермата на фона на простатит е основният източник на хиперпродукция на реактивни кислородни видове, което води до оксидативен стрес и промени във функционалните свойства на спермата. .

При половината (51,5%) от пациентите от безплодни двойки с пиоспермия е открит ASAT, но само при 9,2% те покриват повече от 50% от подвижните сперматозоиди.

Няма корелация между концентрацията на левкоцити в сперматозоидите и процента на ACAT-позитивните подвижни сперматозоиди (R=0,0; p>0,05).

Установихме, че производството на свободни радикали зависи повече от количеството антитела върху сперматозоидите (R = 0,81), отколкото от процента на подвижните MAP-позитивни гамети (R = 0,44), определен с помощта на метода PCM, който препоръчваме като по-голям точна характеристика на активността на автоимунните процеси в еякулата.

Анализирахме характеристиките на производството на ROS при различни форми на патоспермия. Корелационният анализ на параметрите на спермограмата при пациенти с тератозооспермия не разкрива връзка между процента на патологичните форми и производството на ROS. Съществува обаче връзка между процента на сперматозоидите с променена шийка и производството на ROS и липсата на ASAT: r=0,2; стр<0,01. Также в этой выборке обнаружена положительная корреляция между продукцией АФК и процентом сперматозоидов, спонтанно претерпевших акросомальную реакцию: r=0,24; p<0,05 для группы пациентов с нормальной концентрацией сперматозоидов и лейкоцитов.

Увеличаването на нивото на ROS при тератозооспермия може да се обясни с освобождаването на активни радикали с увреждане на мембраните на сперматозоидите, задържане на цитоплазмата и, обратно, което най-вероятно е следствие от производството на морфологично дефектни гамети. В този случай нормалният ход на акрозомалната реакция се нарушава и настъпва апоптоза на гамети с увреждане на целостта на тяхната ДНК (Aitken et al., 1989; Saleh et al., 2003; Jedrzejczak et al., 2005; Deepinder F ., 2008).

Морфологично променените сперматозоиди с дефектна ДНК имат ниска способност за оплождане на яйцеклетка и ако настъпи бременност, рискът от генетични патологии на плода е висок.

маса 1

Промени в производството на активни кислородни фактори, параметри на спермограмата, акрозомална реакция, процент на ACAT-позитивни сперматозоиди и простатна секреция по време на антибиотична терапия за хроничен простатит при мъже от безплодни двойки (M + SE)

Индикатори	Мъже с простатит(n=48)
	Преди лечение	След 2 седмици лечениедниа
Реактивни кислородни видове, mV/s	22,1+6,91	9,28+4,63**
Левкоцити в спермата, х106/мл	2,07+0,52	1,34+0,58
Подвижни сперматозоиди категория А, %	14,1+1,53	18,3+1,7*
Жива сперма, %	73,0+2,7	77,6+2,7*
Левкоцити от простатния секрет, единици в зрителното поле	27,6+4,6	16,8+3,8**
MAR IgG-положителни сперматозоиди, %	31,8+6,93	26,1+6,51**
Преждевременна акрозомна реакция, %	23,3+2,57	18,1+2,21*
Индуцирана акрозомна реакция, %	32,9+3,14	31,7+2,83
Индуцируемост на акрозомна реакция, %	8,8+2,6	13,6+2,3

1 Системният лупус еритематозус (SLE) е класическо автоимунно заболяване, в патогенезата на което водеща роля играе хиперпродукцията на цитотоксични автоантитела към ДНК, образуването на имунни комплекси с последващото им фиксиране под базалната мембрана на епидермиса и в стените на малките съдове, както и процесите на апоптоза. При развитието на органно увреждане при това заболяване е от особено значение увеличаването на производството на реактивни кислородни видове (ROS) от фагоцити, които имат висок хистодеструктивен ефект. В наличната литература не открихме работа за характеристиките на производството на реактивни кислородни видове (ROS) от ключови клетки на острия и хроничен възпалителен процес - циркулиращи неутрофили и моноцити при ставен синдром при пациенти със SLE.

Изследвахме производството на ROS от неутрофили (Nf) и моноцити (Mn), използвайки луминол-зависими и луцигенин-зависими (спонтанни и индуцирани от убити стафилококи) хемилуминесцентни (CL) тестове, отразяващи, съответно, производството на силно токсични реактивни кислородни видове (ROS) в миелопероксидазните и супероксидните анионни системи при 66 пациенти със SLE, както и при 22 здрави донори. Средната възраст на пациентите със SLE е 41,4±10,9 години, продължителността на процеса е съответно 11±4 години. Минималната степен на активност на възпалителния процес (А1) е диагностицирана при 41 пациенти (62,1%), умерена (AII) - при 25 (37,9%). Острото протичане на заболяването се наблюдава при няколко пациенти (техните данни от изследването не са включени в тази работа), подостър курс - при 38 (57,6%), хроничен - при 28 (42,4%). Ставният синдром при SLE се наблюдава при 49 пациенти (74,2%).

При пациенти със SLE, както при наличие, така и при липса на увреждане на ставите, производството на ROS, както Nf, така и Mn, според тестовете на спонтанен луцигенин- и луминол-зависим CL, е повишено в сравнение с показателите на контролната група, характеризираща се чрез производството на широк спектър от ROS, включително силно токсични, с мощен хистодеструктивен ефект. Индуцираните CL тестове се характеризират с променливост и коефициентите на активиране на фагоцитите при двете форми на лупус еритематозус като цяло са намалени, което показва намаляване на резервните функции на циркулиращите фагоцити.

При сравняване на изследваните параметри при пациенти със SLE, в зависимост от наличието или отсъствието на ставен синдром, е установено намаляване на индуцирания луцигенин-зависим CL Nf и спонтанния луминол-зависим CL Nf при пациенти със ставни лезии в сравнение с подобни данни в групата на пациенти със СЛЕ без ставни лезии.

Проведените проучвания показват повишено производство на ROS от циркулиращи фагоцити в SLE, независимо от това дали ставните лезии са налице или липсват. В същото време развитието на ставни лезии при пациенти със SLE е придружено от намаляване на някои показатели за оксидативен стрес на неутрофилите, което показва разнообразието от прояви на оксидативен стрес на фагоцитите в зависимост от клиничните прояви, по-специално от развитието на ставни лезии.

Работата е представена на II научна конференция на студенти, млади учени и специалисти с международно участие „Съвременни проблеми на науката и образованието“, 19-26 февруари 2005 г. Хургада (Египет)

Библиографска връзка

Романова Н.В. ПРОИЗВОДСТВО НА АКТИВНИ ВИДОВЕ КИСЛОРОД ОТ ЦИРКУЛИРАЩИ ФАГОЦИТИ И СТАВЕН СИНДРОМ ПРИ СИСТЕМЕН ЛУПУС ЕРИТЕМАТОЗУС // Напредък в съвременната естествена наука. – 2005. – № 3. – С. 116-116;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=8239 (дата на достъп: 30.01.2020 г.). Предлагаме на вашето внимание списания, издадени от издателство "Академия за естествени науки"